Inmunohistoquímica en su informe de patología: qué significan los patrones de tinción positivos y negativos

Editor de sección: Jason Wasserman, MD, PhD, FRCPC
6 de noviembre.

La inmunohistoquímica , a menudo abreviada como IHQ, es una prueba que muestra si las células de una muestra de tejido producen una proteína específica. La proteína aparece de color marrón o rojo en el portaobjetos dondequiera que esté presente. Los patólogos utilizan la inmunohistoquímica para identificar los tipos de células en una muestra y determinar el origen del cáncer. También la utilizan para encontrar características que ayuden a orientar el tratamiento.

Este artículo explica cómo funciona la inmunohistoquímica y cómo interpretar los resultados en el informe de patología. Aborda el significado de positivo y negativo, la descripción de la intensidad y el patrón de la tinción, y por qué los patólogos suelen realizar varias tinciones simultáneamente.

¿Qué es la inmunohistoquímica?

La inmunohistoquímica utiliza anticuerpos para detectar proteínas específicas en los tejidos. Un anticuerpo es una proteína diseñada para unirse firmemente a una proteína diana y a ninguna otra. En el laboratorio, el anticuerpo se aplica a una fina sección de tejido colocada en un portaobjetos. Una reacción química tiñe de color cada punto donde se ha adherido el anticuerpo.

Cada tipo de célula produce su propia mezcla de proteínas, por lo que el patrón de color le proporciona mucha información al patólogo. Las células que recubren las glándulas producen proteínas diferentes a las de las células musculares, los linfocitos o las células pigmentarias. Cuando el patólogo conoce las proteínas que produce un grupo de células, a menudo puede determinar de qué tipo de células se trata.

La inmunohistoquímica se realiza en el mismo tejido que se utiliza para las preparaciones histológicas de hematoxilina y eosina (H&E) de rutina . No se necesita una nueva biopsia, y cada proteína analizada se tiñe por separado en una lámina individual, a menudo denominada marcador.

Es posible que su informe utilice otros nombres para esta prueba, como «inmunotinción», «tinción inmunohistoquímica» o «inmunorreactividad». También puede indicar que una tinción «resalta» ciertas células. La inmunohistoquímica es diferente de las tinciones especiales . Las tinciones especiales utilizan colorantes químicos en lugar de anticuerpos para teñir estructuras como el colágeno, la mucina o los hongos.

¿Por qué el patólogo solicita la inmunohistoquímica?

Un patólogo solicita inmunohistoquímica cuando las preparaciones teñidas con hematoxilina y eosina por sí solas no pueden responder completamente a la pregunta sobre la muestra. Muchos diagnósticos se realizan sin ella, pero cuando es necesaria, generalmente cumple uno o más de los siguientes propósitos:

Identificar el tipo de células. Algunos tumores se ven similares al microscopio, pero están compuestos de diferentes tipos de células. Un panel de tinciones puede mostrar si un tumor es un carcinoma, un linfoma u otro tipo de cáncer.
Encontrar el origen de un cáncer. Cuando se detecta cáncer en un ganglio linfático, el hígado o los huesos, las tinciones pueden indicar de qué órgano proviene.
Cómo distinguir lo benigno de lo maligno. En la mama y la próstata, tinciones para células mioepiteliales o las células basales ayudan a mostrar si las células se han salido de sus estructuras normales.
Encontrar cantidades muy pequeñas de cáncer. Manchas como citoqueratinas puede revelar algunas células cancerosas en un ganglio linfático que son difíciles de ver con tinción de hematoxilina y eosina.
Orientar el tratamiento. Algunas tinciones permiten determinar si un cáncer presenta una característica a la que se dirige un tratamiento específico. Los receptores de estrógeno y HER2 en el cáncer de mama son ejemplos comunes.
Detección de enfermedades hereditarias. Las tinciones para proteínas de reparación de errores de emparejamiento pueden sugerir que un cáncer está relacionado con una afección hereditaria llamada síndrome de Lynch.
Medir la velocidad a la que se dividen las células. El Ki-67 La tinción marca las células que están en fase de crecimiento activo.

¿Cómo se redactan los resultados de la inmunohistoquímica en un informe de patología?

Los resultados de la inmunohistoquímica suelen figurar en la descripción microscópica, en un comentario o en una sección aparte cerca del diagnóstico. Algunos laboratorios enumeran un marcador por línea, mientras que otros escriben los resultados en una sola frase.

Como una oración. “Las células tumorales dan positivo para CK7 y TTF-1 y negativo para CK20”. Esto significa que las células cancerosas producen las dos primeras proteínas, pero no la tercera.
Como una lista con símbolos. “CK7 (+), CK20 (−), TTF-1 (+).” Un signo más significa positivo y un signo menos significa negativo.
Como declaración de apoyo. “La inmunohistoquímica respalda el diagnóstico” significa que las tinciones coinciden con el diagnóstico que el patólogo realizó a partir de las muestras teñidas con hematoxilina y eosina.
Como descripción de lo que muestra una mancha. “p63 resalta una capa de células mioepiteliales intacta” significa que la tinción muestra una capa de células normales que rodean las glándulas.

En ocasiones, las tinciones se finalizan después de la publicación del primer informe, y los resultados suelen aparecer en un anexo . Nuestro artículo sobre pruebas pendientes o adicionales explica qué esperar mientras tanto.

¿Qué significan positivo y negativo?

En inmunohistoquímica, un resultado positivo indica que las células producen la proteína analizada. Un resultado negativo indica que no la producen o que la cantidad producida es insuficiente para detectarla. Un resultado positivo no significa necesariamente cáncer, y un resultado negativo no significa que no haya cáncer.

Inmunohistoquímica

Que un resultado sea bueno o malo depende completamente del evaluador y de la pregunta formulada. Muchos resultados positivos son alentadores, y algunos negativos son esperables. Algunos ejemplos ilustran por qué:

Marcadores mioepiteliales en la mama. Cuando una mancha como p63 Si se observa un anillo completo de células mioepiteliales alrededor de un grupo de células, el cambio es benigno o no invasivo. Si el anillo no está presente, es posible que las células hayan invadido el tejido celular.
E-cadherina en cáncer de mama. La mayoría de los carcinomas ductales dan positivo para E-cadherina, mientras que la mayoría de los carcinomas lobulares la han perdido. Un informe que indique que la E-cadherina es fuertemente positiva suele ayudar a confirmar un cáncer de tipo ductal.
Proteínas de reparación de errores de emparejamiento. La tinción normal de las cuatro proteínas de reparación de errores de emparejamiento es el resultado esperado y tranquilizador, mientras que la pérdida de tinción es el hallazgo que requiere seguimiento.

Las tinciones suelen colorear tanto las células normales como las anormales. Un informe podría indicar que una tinción de citoqueratina «resalta los neumocitos reactivos de fondo», que son células normales del revestimiento pulmonar. Esto es lo esperado, y el comentario describe lo que mostró la tinción.

¿Qué significan la intensidad, la cantidad y el patrón de la tinción?

Muchos informes describen la inmunohistoquímica con mayor detalle que simplemente indicar si es positiva o negativa. Estos detalles son cruciales para las tinciones que guían el tratamiento, ya que los niveles de proteínas pueden modificar el resultado.

Intensidad. Así de oscuro es el color, descrito como débil, moderado o fuerte. Algunos informes utilizan una escala numérica del 0 al 3+.
Porcentaje. La proporción de células que se tiñen. Un informe podría decir: "receptor de estrógeno positivo en el 90% de las células tumorales".
Distribución. Cómo se distribuyen las células teñidas. "Focal" significa solo unas pocas áreas, "en parches" significa áreas dispersas y "difuso" significa la mayoría o todas las células.
Ubicación en la celda. Algunas proteínas se encuentran en el núcleo, otras en el citoplasma y otras a lo largo de la membrana celular. Una tinción en la parte incorrecta de la célula puede ser anormal incluso cuando el resultado es positivo.

Algunas tinciones se interpretan según el patrón, no según la cantidad. La tinción p16 , por ejemplo, se denomina "tipo bloque" o "difusa" cuando tiñe una banda continua de células. Este patrón sugiere una infección por un tipo de VPH de alto riesgo, mientras que una tinción irregular no tiene el mismo significado.

La tinción de p53 es otro ejemplo basado en patrones. Una mezcla de núcleos con tinción clara y oscura se denomina tipo silvestre, que es el patrón normal. La tinción intensa en casi todas las células, la ausencia total de tinción o la tinción citoplasmática constituyen patrones aberrantes. Cada patrón aberrante sugiere una alteración en el gen TP53 .

También puede aparecer la expresión «expresión aberrante». Esto significa que las células están produciendo una proteína que normalmente no producirían. Puede indicar la presencia de células anormales, pero su significado depende del marcador específico.

¿Cómo puede un panel de tinciones mostrar dónde comenzó un cáncer?

Cuando se detecta cáncer en un lugar distinto a su origen, un panel de tinciones inmunohistoquímicas puede ayudar a encontrar el punto de inicio. Esto es importante porque los médicos suelen tratar los cánceres según el órgano de donde provienen. Un cáncer detectado en el hígado que se originó en el colon se trata como cáncer de colon.

Los patólogos suelen comenzar con dos citoqueratinas llamadas CK7 y CK20 . Los distintos órganos tienden a producir diferentes combinaciones de estas dos proteínas. Un cáncer que da negativo para CK7 y positivo para CK20, por ejemplo, suele originarse en el colon o el recto.

A continuación, el patólogo añade tinciones para proteínas que se producen principalmente en uno o pocos órganos. Algunos ejemplos comunes son:

TTF-1. Producida por la mayoría de los adenocarcinomas de pulmón y por tumores de tiroides.
GATA3. Producida por la mayoría de los cánceres de mama y por los cánceres de vejiga.
PAX8. Producida por muchos tumores renales, ginecológicos y tiroideos.
CDX2. Producida por la mayoría de los cánceres de intestino.
SOX10. Producido por la mayoría de los melanomas.

Ninguna tinción es perfecta por sí sola, por lo que se utilizan varias en combinación. Algunos tumores producen proteínas inesperadas, y los cánceres poco diferenciados pueden perder los marcadores de su órgano de origen. El patólogo interpreta el panel completo junto con las preparaciones teñidas con hematoxilina y eosina, su historial médico y los resultados de las pruebas de imagen.

¿Qué resultados de la inmunohistoquímica ayudan a orientar el tratamiento?

Algunos resultados de inmunohistoquímica son biomarcadores que ayudan a su oncólogo a elegir el tratamiento. Para estas tinciones, los laboratorios siguen estrictas directrices nacionales, y los valores exactos en su informe son importantes. Nuestra sección de Biomarcadores explica cada uno en detalle.

Receptores de estrógeno y progesterona. Según la guía ASCO/CAP 2020, un cáncer de mama con tinción del receptor de estrógeno en el 1 % o más de las células tumorales es positivo para el receptor de estrógeno. Los resultados del 1 % al 10 % se informan como "ER bajo positivo". Véase Receptores de estrógeno y progesterona en el cáncer de mama.
HER2. Los cánceres de mama se clasifican con una puntuación de 0, 1+, 2+ o 3+ según la guía ASCO/CAP 2023. Una puntuación de 2+ es equívoca y requiere una prueba de hibridación in situ. Véase HER2 en el cáncer de mama.
PD-L1. Esta tinción ayuda a predecir si se puede considerar la inmunoterapia. La puntuación varía según el tipo de cáncer y la prueba utilizada. Ver Pruebas de PD-L1 en cáncer.
ALK. En el cáncer de pulmón, una tinción ALK aprobada por la FDA puede identificar cánceres que podrían responder a fármacos dirigidos a ALK. Ver Reordenamientos de ALK en el cáncer de pulmón.

Incluso los niveles bajos de HER2 pueden ser relevantes, aunque la guía de 2023 no considera la categoría "HER2 bajo" como independiente. Las personas con cáncer de mama metastásico y un nivel de HER2 de 1+ pueden ser candidatas a un fármaco más reciente dirigido a HER2 si cumplen con otros criterios de tratamiento. Lo mismo se aplica a un nivel de 2+ con una prueba de hibridación in situ negativa.

¿Cómo se utiliza la inmunohistoquímica para detectar síndromes de cáncer hereditario?

La inmunohistoquímica para proteínas de reparación de errores de emparejamiento es una de las formas más comunes de detectar el síndrome de Lynch. El síndrome de Lynch es una afección hereditaria que aumenta el riesgo de cáncer colorrectal, de endometrio y otros tipos de cáncer. La prueba detecta cuatro proteínas que funcionan en dos pares: MLH1 con PMS2 y MSH2 con MSH6.

Las guías de la NCCN para el cáncer de colon (versión 4.2023) y el cáncer de útero (versión 1.2024) recomiendan esta prueba para todos los casos de cáncer colorrectal y de endometrio recién diagnosticados, independientemente de los antecedentes familiares.

Las cuatro proteínas están presentes. El sistema de corrección de errores parece funcionar con normalidad. Los informes pueden describirlo como "intacto" o "eficiente".
Pérdida de MLH1 y PMS2. Esto suele deberse a un cambio en el tumor que no es hereditario. Una prueba de seguimiento, denominada prueba de hipermetilación del promotor MLH1, ayuda a distinguir entre ambas.
Pérdida de MSH2 y MSH6, o de una sola proteína. Esto plantea la posibilidad del síndrome de Lynch. Habitualmente recomendamos derivar al paciente a consulta genética y realizarle pruebas genéticas de la línea germinal.

Nuestros artículos sobre la reparación de errores de emparejamiento, la inestabilidad de microsatélites y el síndrome de Lynch explican estos resultados y los próximos pasos.

¿Cómo garantiza el laboratorio la exactitud de los resultados de la inmunohistoquímica?

Los resultados de la inmunohistoquímica solo son fiables cuando la tinción funciona correctamente. Los laboratorios utilizan diversas medidas de seguridad para comprobarlo cada vez que se realiza una tinción.

Cada tinción se realiza con un control , un fragmento de tejido que se sabe que contiene la proteína que se está analizando. Si el control no se tiñe, no se puede confiar en el resultado de la muestra y se repite la prueba. Muchas muestras también contienen células normales que deberían teñirse y actuar como control interno. En el informe puede aparecer la siguiente indicación: «El control interno es positivo, como corresponde».

Antes de que un laboratorio utilice una nueva tinción en muestras de pacientes, debe probarla en tejidos con resultados positivos y negativos conocidos. El Colegio Estadounidense de Patólogos publicó una guía sobre este proceso en 2014. Las tinciones que guían el tratamiento, como HER2 y el receptor de estrógeno, deben cumplir requisitos más estrictos que otras tinciones.

¿Cuáles son los límites de la inmunohistoquímica?

La inmunohistoquímica es una herramienta poderosa, pero tiene limitaciones que los patólogos consideran. Los patólogos siempre interpretan los resultados junto con las preparaciones teñidas con hematoxilina y eosina y la información clínica, nunca de forma aislada.

Ninguna mancha es completamente específica. Una proteína típica de un órgano puede aparecer a veces en cánceres de otro órgano.
Los cánceres pueden perder marcadores. Los cánceres poco diferenciados pueden dejar de producir las proteínas que identificarían su origen.
Muestras pequeñas. Una biopsia pequeña puede no contener suficientes células para todas las tinciones que el patólogo desearía realizar.
Manipulación de tejidos. La rapidez con la que se fijó el tejido y la forma en que se procesó pueden afectar la tinción.

Cuando la inmunohistoquímica no permite obtener una respuesta, el patólogo puede recurrir a las pruebas moleculares , que analizan directamente el ADN o el ARN en lugar de las proteínas. Nuestro artículo sobre secuenciación de nueva generación explica una de las pruebas más comunes.

Preguntas para hacerle a su médico

¿Se realizó un análisis inmunohistoquímico en mi muestra y por qué fue necesario?
¿Qué tinciones se realizaron y qué reveló cada una?
¿Las tinciones confirmaron el diagnóstico o lo modificaron?
Si mi cáncer se detectó fuera del órgano donde se originó, ¿las tinciones mostraron de dónde provenía?
¿Se realizaron pruebas de tinción para ayudar a elegir mi tratamiento?
¿Cuáles fueron los resultados de mis pruebas de receptores de estrógeno, receptores de progesterona o HER2, en caso de que me las realizaran?
¿Se me realizó la prueba de reparación de errores de emparejamiento del ADN? ¿Necesito asesoramiento genético?
¿Quedan algunas manchas pendientes y cuándo se añadirán los resultados a mi informe?
¿Las pruebas moleculares aportarían información que las tinciones no podrían proporcionar?

Inmunohistoquímica en su informe de patología: qué significan los patrones de tinción positivos y negativos.